启新（苏州）生物科技有限公司

知识天地

【你问我答】CCFA的2种配方，哪种分离艰难梭状芽胞杆菌更佳?

2017.01.16

答：

分离Clostridiumdifficile (艰难梭状芽孢杆菌) 的CCFA有两种配方：

一种含有马血，另一种含有neutral red(中性红)。

含有马血的taurocholate(牛磺胆酸钠)，但不含neural red，其对C. difficile分离率(24小时为99%，48小时为100%)，优于含有卵黄及中性红、但不含马血的CCFA(24小时为91%，48小时为96%)。

同时前者的菌落大小约后者的1.7倍，生长的菌落数也较多。

将检体接种于增菌培养基CCMB- TAL，更能提升艰难梭状芽孢杆菌分离率，但直接从此增菌培养基侦测毒素并不灵敏。

根据美国微生物学会出版的临床微生物检验手册书籍(MCM)说明:

C. difficile会发酵fructose产酸，但其属于弱阳性，也就是说pH值下降不明显，因此酸碱指示剂neutral red转变成黄色的程度不大，况且许多菌落生长在同一区域划线处，众菌共同利用fructose，故产酸不明显，C. difficile的菌落在pH7.0左右的环境仍然呈黄色(碱)之故。

这些现象有别于MacConkey用neutral red作为pH indicator，当E. coli在MacConkey上发酵lactose产酸会使菌落呈红色的现象不同，E. coli生长的菌落颜色呈红色，符合neutral red(中性红)颜色变化：红(酸)→黄(碱)。

参考文献：

1. 蔡文城，蔡岳廷。嗜氧性革兰氏阴性杆菌之鉴定。实用临床微生物诊断学，第十版。2011：1196。九州岛图书文物有限公司，台北。

2. Novak-WeekleySM, Marlowe EM, Miller JM et al. Clostridium difficile testing in the clinicallaboratory by use of multiple testingalgorithms. J Clin Microbiol 2010; 48:889-93.

3. Stevens DL, Bryant AE, Berger A, vonEichel-Streiber C. Clostridium. In Versalovic J, Carroll KC, Funke G,Jorgensen JH, Landry ML, Warnock DW.(eds.). Manual of Clinical Microbiology. 10thed., 2011:834-57.

ASM. Washington DC, U.S.A.

4. Difco. 1985. Difco Manual. 10thed. 1984:546-51. Difco laboratories,

Detroit, Michigan, U.S.A.